مقطع : دانشجوی دکتری
دانشگاه : دانشگاه جامع امام حسین (ع)
تاریخ دفاع : 1394/10/27
اساتید راهنما : دکتر حسین هنری
اساتید مشاور : دکتر حامد باقری، دکتر مجتبی نوفلی
اساتید داور : دکتر ایوب آرپنائی، دکتر فیروز ابراهیمی، دکتر جعفر امانی
مشاهده سایر پایان نامه های مسیح اعتماد
سیاه¬زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می¬باشد. باكتري باسيلوس آنتراسيس به دلايل كشندگي بسيار بالا و توليد و انتشار بسيار آسان آن و استفاده آن به صورت تنفسي، گوارشي و پوستي يكي از بزرگترين و مهمترين سلاحهاي بيولوژيك به شمار مي¬رود. براي مقابله با اين گونه سلاحهاي تهديد¬كننده جدي سلامت و امنيت جامعه به تهيه واكسن هاي فوري و قابل اطمينان نياز مبرم احساس مي¬شود. هزينه واكسن¬هاي قديمي به دليل توليد، نگهداري، آماده سازي و پخش گسترده آن بسيار بالا است. در واكسن‌هاي تهيه¬شده علیه سیاه¬زخم، آنتي‌ژن حفاظتی (PA) عامل اصلي ايمني‌زايي محسوب شده و PA در غياب LF و EF قادر به ايجاد ایمنی¬زایی در موجودات زنده است. واكسن‌هاي جديد امروزی به صورت واكسن‌هاي PA خالص یا امتزاجی، واكسن‌هاي نوتركيب و واکسن ¬هاي جهش يافته مورد استفاده قرار مي‌گيرند. آنتی¬ژن حفاظتی تغییر یافته(mPA) باسیلوس آنتراسیس برای درمان و واکسن قابل استفاده می¬باشد. هدف این مطالعه بیان mPA باسیلوس آنتراسیس در باکتری E. coli و گیاه و همچنین انکپسوله کردن آن در نانوسفرهای کوپلیمری سه بلوکه PEG-PLA-PEG می¬باشد. قطعات ژنی مورد نظر در کلونینگ وکتور همسانه¬سازی می¬گردد و بعد به وکتور pET28a(+) زیرهمسانه¬سازی و به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت می¬شود. بيان mPA باسیلوس¬آنتراسیس انجام و بعد از تخلیص پروتئین، آنتی¬ژن حاصل به حیوان آزمایشگاهی تزریق می¬شود و آنتی¬بادی پلی¬کلونال تولید¬شده در سرم حیوان آزمایشگاهی اندازه¬گیری می¬گردد. با شناسایی آنتی¬ژن PA بوسیله آنتی¬بادی mPA باسیلوس آنتراسیس، می¬تواند به¬صورت مجزا، یا ترکیبی با ساير دومن¬هاي PA در طراحی واکسن و بعنوان داروی مهندسی¬شده نوترکیب برای درمان و پیشگیری بیماری سیاه¬زخم استفاده شود. برای تولید آنتی¬ژن و پروتئین¬های نوترکیب نیاز به میزبان مناسبی است که از جمله آنها گیاهان مدنظر قرار دارند. كشاورزي مولكولي با دارا بودن توان توليد پروتئين¬هاي مهم نوترکیب و دارویی در گياهان، پتانسيل زیادی در توليد دارد. استفاده از سيستم گياهي بسيار اقتصادي¬تر از تولید ساير روش¬ها است. همچنین اثرات انکپسوله-کردن پروتئین تولیدی در نانوذرات بر روی تولید آنتی¬ژن پروتئین مورد نظر نیز مورد بررسی قرار می¬گیرد.